手性分析色谱柱
手性分离色谱柱包括ChrialCD-Ph,CeramospherChiralRU-2和CeramospherChiralRU-1三种类型。RU-1、RU-2、CD-Ph色谱柱的使用注意事项:
ChiralCD-Ph色谱柱是以精密分级的高纯度硅胶为基材,通过苯基氨基甲酸酯化将β-环糊精进行化学键合的光学异构体分离专用色谱柱。
流动相
1.可用流动相种类与一般化学键合型硅胶类色谱柱所使用的流动相相同。
2.ChiralCD-Ph的可用pH范围为3.5-6.5。为防止色谱柱的早期劣化,请注意流动相的pH不要超过该范围。
使用%的水相会引起色谱柱的劣化,请尽量避免。
与CAPCELLPAK不同,CD-Ph不能使用碱性的流动相。
3.请确认流动相不会盐析,并在过滤(0.45μm以下滤膜)去除杂质后再对其进行充分脱气。色谱柱入口处使用了2μm的过滤筛板,但是,为防止由异物导致的色谱柱入口堵塞,建议使用线上过滤器。
4.新色谱柱使用色谱柱报告中标示的流动相封存。若要使用正己烷系的流动相,请用乙醇或者异丙醇进行充分置换后再使用。
5.以下使用方法一般会导致色谱柱劣化,故应避免此类操作。
1)频繁变更流动相的组成或直接变更为相溶性差的流动相
2)色谱柱入口压力的急剧变化
3)使用高粘度的流动相而导致色谱柱压力升高
6.ChiralCD-Ph的通常最大使用压力为20MPa。使用高粘度流动相或在低温下进行测定时需要注意。
7.使用ChiralCD-Ph时,为了得到稳定的保留时间,最少需要平衡3小时。
样品溶液的配制
1.请尽量将样品溶解在流动相中进行分析。
2.若采用洗脱能力强的溶剂,则分离能力降低,并且色谱柱前端可能会有样品析出,故需注意。
3.若样品溶液中有不溶物残留,请用滤膜(0.45μm以下)过滤。
手性分离注意事项
1.温度:低温对手性分离更加有利。推荐从室温(25°C)开始进行分析。另外,填料在80°C以下能保持稳定。
2.流速:低流速对手性分离更加有利。推荐从μL/min开始进行分析。
3.流动相:
●非离子性化合物
推荐按照甲醇/水系、乙腈/水系的顺序进行手性分离的尝试。极性有机溶剂(甲醇、乙腈)的比例从90%开始逐渐减少,将目的化合物的保留时间调整到7-30分的范围内。
●离子性化合物
请使用20-50mmol/L的磷酸二氢钾水溶液与有机溶剂的混合液作为流动相。也可用高氯酸钠或乙酸-三乙胺代替磷酸盐。推荐按照乙腈系、甲醇系的顺序来进行手性分离的尝试。
CeramospherChiralRU-2是在球状陶瓷基材上做特殊的疏水化处理,键合了具有光学活性的金属配位体的全新光学异构体分离色谱柱。
流动相
1.除了甲醇之外,还可以使用乙醇、异丙醇、乙腈、氯仿、正己烷等非水系溶剂,但不要期待比甲醇更好的分离效果。
2.也可以在甲醇中添加体积分数1%以下的异丙胺、二乙胺、三乙胺或醋酸作为流动相。
3.请过滤(0.45μm以下滤膜)流动相去除杂质后再进行充分脱气。色谱柱入口处使用了孔径2μm的过滤筛板。为防止由异物导致的色谱柱入口过滤筛板堵塞,建议使用线上过滤器。
4.色谱柱采用甲醇封存。
5.长期使用同一溶剂瓶时,请采取在瓶口加上干燥管等措施,尽量避免水的混入。
6以下使用方法一般会导致色谱柱劣化,请避免此类操作。
1)使用含水分的流动相或注入含水分的样品溶液
2)频繁变更流动相的组成和直接变更为相溶性差的流动相
3)色谱柱入口压力的急剧变化
4)选用粘度高的流动相而导致色谱柱压力升高
7.该色谱柱的最大使用压力为20MPa。
温度
CeramospherRU-2对于温度非常稳定。虽然随流动相的粘度和沸点有所变化,但使用水/甲醇系流动相时,请在15~60°C的范围内使用。
CeramospherChiralRU-1是在球状陶瓷基材上做特殊的疏水化处理,键合了具有光学活性的金属配位体的全新光学异构体分离色谱柱。
1.流动相的配制方法
2.出厂时,色谱柱采用甲醇封存。
3.以下使用方法一般会导致色谱柱劣化,请避免此类操作。
1)频繁变更流动相的组成和直接变更为相溶性差的流动相
2)色谱柱入口压力的急剧变化
3)选用粘度高的流动相而导致色谱柱压力升高
4.该色谱柱的最大使用压力为20MPa。为了不超过该压力,请参考下表进行流速设定。
甲醇1.0mL/min
水/甲醇系0.5mL/min
乙腈1.0mL/min
水/乙腈系0.5mL/min
5.KH2PO4在水/甲醇、水/乙腈溶液中比较难溶,请按照以下程序来配制。
1)用水将KH2PO4完全溶解;
2)一边搅拌一边向其中添加甲醇或乙腈;
3)脱气后,确认KH2PO4不会析出。
样品溶液的配制
1.请尽量将样品溶解在流动相中进行分析。
2.样品溶液若采用洗脱能力强的溶剂,会造成分离能力降低,同时色谱柱前端可能有样品析出,故需注意。
3.若样品溶液中有不溶物残留,请用滤膜(0.45μm以下)过滤。
温度
CeramospherRU-1对于温度非常稳定。虽然随流动相粘度和沸点有所变化,但使用甲醇系流动相时,请在-20~50°C的范围内使用。